بررسی الکتروپوریشن برگشت ناپذیر روی مرگ رده‌ی سلولی سرطان پستان سه گانه منفی ((MDA-MB-231

چکیده:

امروزه سرطان پستان عامل اصلی مرگ و میر ناشی از سرطان در میان زنان است. در میان انواع سرطان پستان، سرطان پستان سه‌گانه منفی (15 درصد از سرطان‌های پستان) با عدم بیان گیرنده­های استروژن و پروژسترون (ER و PR) و نیز عدم بیان بیش از حد گیرنده 2 فاکتور رشد اپیدرمی انسانی (HER2) مشخص می‌شود. درمان سرطان پستان سه‌گانه منفی به دلیل ماهیت تهاجمی، بازگشت زودرس و فقدان اهداف درمانی خاص، هنوز با چالشی مهم روبرو است. درمان‌های مبتنی بر پدیده الکتروپوریشن با نتایج خوب و دلگرم کننده می‌تواند امیدها را در بیماران سرطانی زنده کند. قرارگرفتن تعلیق سلولی و بافت‌ها در معرض پالس‌های الکتریکی با ولتاژ بالا، پدیده‌ای را تحریک می‌کند که امروزه الکتروپوریشن نامیده می‌شود. در این پدیده غشاهای سلولی نسبت به مولکول‌هایی که امکان عبور از آن را ندارند، نفوذپذیرتر می‌شوند. الکتروپوریشن برگشت‌ناپذیر به معنای استفاده از پالس­های الکتریکی با شدت میدان الکتریکی (قدرت) بالا برای ایجاد منافذ غشای سلولی است که باعث آسیب و در نهایت مرگ سلول می­گردد. در این پژوهش از دستگاه الکتروپوریشن برگشت‌ناپذیر ساخته شده توسط گروه مهندسی برق دانشگاه کاشان به منظور بررسی مرگ رده‌ی سلولی سرطانی MDA-MB-231 سرطان پستان سه‌گانه منفی در شرایط آزمایشگاهی استفاده شد. سلول‌های سرطانی رده MDA-MB-231 پس از کشت در محیط RPMI1640 غنی شده با FBS 10 درصد و محلول پنی‌سیلین- استرپتومایسین 1 درصد، به صورت تعلیق درآمدند. سپس با استفاده از کووت‌های الکتروپوریشن در مدار الکتروپوریشن با مؤلفه‌های تعداد پالس، قدرت پالس، عرض پالس و بسامد مشخص، مورد اعمال پالس‌های الکتریکی دستگاه الکتروپوریشن برگشت‌ناپذیر قرار گرفتند. پس از اعمال پالس‌های الکتریکی بلافاصله میزان زنده‌مانی سلول‌ها با دو روش رنگ­آمیزی تریپان بلو و فلوسایتومتری بررسی گردید. دمای تعلیق‌های سلولی نیز قبل و بعد از اعمال پالس‌های الکتریکی اندازه‌گیری شد. در مجموع 9 نمونه سلولی (تعلیق‌های رده سلولی MDA-MB-231 که داخل کووت‌های جداگانه جهت اعمال پالس‌های الکتریکی ریخته شدند) مورد آزمایش با اعمال 9 برنامه پالسی تنظیم شده متفاوت برای هر کدام از نمونه‌ها بر روی دستگاه الکتروپوریشن برگشت‌ناپذیر از نظر مؤلفه‌های پالسی قرار گرفتند. براساس نتایج به‌دست آمده توسط دماسنج لیزری در بررسی تمامی نمونه‌های سلولی، دستگاه الکتروپوریشن برگشت‌ناپذیر توانایی از بین بردن سلول‌های سرطانی را بدون آسیب حرارتی دارد. زنده‌مانی در نمونه سلولی شماره 5 با برنامه پالسی (قدرت پالس 200 ولت، تعداد پالس 90 عدد، عرض پالس 100 میکروثانیه و بسامد 1 هرتز) با میزان 29/6 درصد در روش ارزیابی فلوسایتومتری و هم به طور میانگین تعداد دفعات تکرار با میزان 4/14 درصد در روش ارزیابی با تریپان بلو بسیار مطلوب مشاهده شد.